Molekylspektra De olika färgerna representerar olika koncentrationer.

En presentation över ämnet: "Molekylspektra De olika färgerna representerar olika koncentrationer."— Presentationens avskrift:

1 Molekylspektra De olika färgerna representerar olika koncentrationer

2 Analys av blod

3 Analyser som kan utförat på kemiska laboratoriet i Huddinge

4 Spectroskopi Molekylspektroskopi uv/vis
Absorptionsspektrometri infraröd (filterfotometri, spektrofotometri) Nefelometri (turbidimetri) Emissionsspektrometri fluorescens (fotoluminescens) (fosforescens)

5 Spektroskopi 2. Atomspektrometri Atomabsorption Atomemission Röntgenfluorescens 3 NMR-spektroskopi (kärn-magnetisk resonans)

6 Atom elektronskal elektronorbital 3p 3s kärna

7 Atomspektrum Absorption Emission Natrium-atom Natrium-atom våglängd

8 Na-spektrum Energinivåer i elektronhöljet

9 Na-spektrum

10 Ljusabsorption i atom Exitation Relaxation (de-exitation) E1 E1
Exiterad nivå Exiterad nivå Ef = hc/l DE = Ef DE = Ef Grundnivå E0 Grundnivå E0 Strålningslös övergång

11 Användningsområden för atomspektroskopi
Identifikation av metalljoner (Na, K, Cu , Hg,…, Koncentrationsbestämningar av metalljoner i kroppsvätskor Alternativ metod är jon-selektiv elektrod (jmf pH-elektrod)

12 Användningsområden av molekylspektroskopi(UV/VIS)
Koncentrationsbestämningar av alla lösningar som absorberar ljus i UV eller Visuella området, tex. Hb-bestämning , kan även användas för gaser Kinetiska studier

13 Molekyl Elektronövergång (n – s*) storlek 2 - 6 eV Vibration
Rotation C:a 0,001 eV

14 Absorption i molekyl Transmittans Absorbans (= -log T) 1 10% Våglängd
560 560

15 Ljusabsorption i molekyl
Exitation Relaxation (de-exitation) E1 Strålningslös övergång Ef = hc/l DE = Ef DE = Ef Grundnivå Grundnivå E0

16 Absorptionsspektroskopi
Transmittans Filter Vitt ljus 100% 35% Prov Transmittans 35% 100% 100% våglängd Vatten 35%

17 Absorptionsspektroskopi
Transmittans = I/I0 Prov I0 I 100% 35% 100% 35% våglängd Absorbans Prov I0 I I = I0* 10-A A = -log T

18 Absorptionsspektroskopi
Absorbans Prov I0 I våglängd I = I0* 10-A Absorbans A = a . b . c Prov I0 I a c a = ämneskonstant c = koncentration c b

19 Principen för en fotometer

20 Absorptionsspektroskopi
Absorbans Prov I0 I a 1 c1 0,5 c1 c2 a c2 c c2 = 8mg/ml

21 Kromoforer (ex) Aromatiska ringar (Benzen) proteiner Phe, Tyr, Trp,His (280nm) Nukleotider C,G,A,T (260nm) DNA, RNA Dubbel och trippel-bindningar

22 Användningsområden av molekylspektroskopi (infraröd)
Bygger på ”ljusabsorption” i vibrationsnivåer Identifikation av molekyler Kontroll av renhet Bestämmning av molekylstruktur

23 Absorption inom infraröda området
DE = Ef DE = Ef Exitation Ef = hc/l Relaxation Strålningslös övergång Grundnivå Grundnivå E0

24 Molekylens vibrations- och rotationsnivåer
acetophenone Vibration 0,1 –0,01 eV Rotation C:a 0,001 eV

25 Användningsområden flourescens
Bestämning av låga koncentrationer Bestämning av molekylers massa Immunologiska bestämningar

26 Emissionspektroskopi
Transmittanas Prov 130 Prov våglängd Fluorescens Prov 130

27 Emissionspektroskopi
Prov Transmittans INGEN FLUORESCENS Prov våglängd

28 Ljusemission i molekyl
Exitation Relaxation (de-exitation) Strålnings- lös övergång E1 Ef = hc/l DE = Ef DE = Ef Grundnivå Grundnivå E0

29 Flouroforer Aromatiska ringar
T. ex. Aminosyror: Tyr, 275nm – 303nm Trp 280nm – 348 nm

30 Fluorokromer Fluorescein 495 519 389 FITC; pH sensitive FluorX 494 520
  587 (AP Biotech) BODIPY-FL 503 512 TRITC 547 572 444 X-Rhodamine 570 576 548 XRITC Acridine Orange 503 530/640 DNA/RNA Ethidium Bromide 493 620  394